Ďakujeme za návštevu stránky Nature.com. Verzia prehliadača, ktorú používate, má obmedzenú podporu CSS. Pre dosiahnutie najlepších výsledkov odporúčame používať novšiu verziu prehliadača (alebo vypnúť režim kompatibility v prehliadači Internet Explorer). Medzitým, aby sme zabezpečili nepretržitú podporu, zobrazujeme stránku bez štýlov a JavaScriptu.
Mikrobiálny rast v ranách sa často prejavuje ako biofilmy, ktoré narúšajú hojenie a je ťažké ich odstrániť. Nové strieborné obväzy údajne bojujú proti infekciám rán, ale ich účinnosť proti biofilmu a hojivé účinky nezávislé od infekcie sú vo všeobecnosti neznáme. Použitím in vitro a in vivo modelov biofilmu Staphylococcus aureus a Pseudomonas aeruginosa uvádzame účinnosť obväzov generujúcich ióny Ag1+; obväzov Ag1+ obsahujúcich kyselinu etyléndiamíntetraoctovú a benzetóniumchlorid (Ag1+/EDTA/BC) a obväzov obsahujúcich dusičnan strieborný (Ag oxysoli), ktoré produkujú ióny Ag1+, Ag2+ a Ag3+ na boj proti biofilmu rán a jeho vplyvu na hojenie. Obväzy Ag1+ mali minimálny vplyv na biofilm rán in vitro a u myší (C57BL/6j). Naproti tomu okysličené soli Ag a obväzy Ag1+/EDTA/BC významne znížili počet životaschopných baktérií v biofilmoch in vitro a preukázali významné zníženie bakteriálnych a EPS zložiek v biofilmoch rán myší. Tieto obväzy mali odlišný vplyv na hojenie rán infikovaných biofilmom a rán neinfikovaných biofilmom, pričom obväzy s okysličenou soľou mali priaznivejšie účinky na reepitelizáciu, veľkosť rany a zápal v porovnaní s kontrolnou liečbou a inými striebornými obväzmi. Rôzne fyzikálno-chemické vlastnosti strieborných obväzov môžu mať odlišný vplyv na biofilm rany a hojenie, a to by sa malo zohľadniť pri výbere obväzu na liečbu rán infikovaných biofilmom.
Chronické rany sú definované ako „rany, ktoré neprechádzajú bežnými štádiami hojenia riadnym a včasným spôsobom“1. Chronické rany predstavujú psychologickú, sociálnu a ekonomickú záťaž pre pacientov a systém zdravotnej starostlivosti. Ročné výdavky NHS na liečbu rán a súvisiacich komorbidít sa v rokoch 2017 – 2018 odhadujú na 8,3 miliardy libier2. Chronické rany sú v súčasnosti naliehavým problémom aj v Spojených štátoch, pričom Medicare odhaduje ročné náklady na liečbu pacientov s ranami na 28,1 – 96,8 miliardy dolárov3.
Infekcia je hlavným faktorom brániacim hojeniu rán. Infekcie sa často prejavujú ako biofilmy, ktoré sú prítomné v 78 % nehojacích sa chronických rán. Biofilmy sa tvoria, keď sa mikroorganizmy ireverzibilne prichytia na povrchy, ako sú povrchy rán, a môžu sa agregovať a vytvárať komunity produkujúce extracelulárne polyméry (EPS). Biofilm v rane je spojený so zvýšenou zápalovou reakciou, ktorá vedie k poškodeniu tkaniva, čo môže oddialiť alebo zabrániť hojeniu4. Zvýšenie poškodenia tkaniva môže byť čiastočne spôsobené zvýšenou aktivitou matrixových metaloproteináz, kolagenázy, elastázy a reaktívnych foriem kyslíka5. Okrem toho sú zápalové bunky a biofilmy samy osebe vysokými spotrebiteľmi kyslíka, a preto môžu spôsobiť lokálnu hypoxiu tkaniva, čím sa bunkám odčerpáva životne dôležitý kyslík potrebný na účinnú opravu tkaniva6.
Zrelé biofilmy sú vysoko odolné voči antimikrobiálnym látkam, čo si vyžaduje agresívne stratégie na kontrolu infekcií biofilmov, ako je mechanické ošetrenie s následnou účinnou antimikrobiálnou liečbou. Keďže biofilmy sa dokážu rýchlo regenerovať, účinné antimikrobiálne látky môžu znížiť riziko opätovnej tvorby po chirurgickom debridemente7.
Striebro sa čoraz viac používa v antimikrobiálnych obväzoch a často sa používa ako liečba prvej voľby pre chronicky infikované rany. Existuje mnoho komerčne dostupných strieborných obväzov, z ktorých každý obsahuje iné zloženie, koncentráciu a základnú matricu striebra. Pokroky v oblasti strieborných náramkov viedli k vývoju nových strieborných náramkov. Kovová forma striebra (Ag0) je inertná; na dosiahnutie antimikrobiálnej účinnosti musí stratiť elektrón, aby vytvorilo iónové striebro (Ag1+). Tradičné strieborné obväzy obsahujú zlúčeniny striebra alebo kovové striebro, ktoré sa pri vystavení kvapaline rozkladajú za vzniku iónov Ag1+. Tieto ióny Ag1+ reagujú s bakteriálnou bunkou a odstraňujú elektróny zo štrukturálnych zložiek alebo kritických procesov potrebných pre prežitie. Patentovaná technológia viedla k vývoju novej zlúčeniny striebra, oxysolí Ag (dusičnan strieborný, Ag7NO11), ktorá je súčasťou obväzov na rany. Na rozdiel od tradičného striebra, rozklad solí obsahujúcich kyslík vytvára stavy striebra s vyššou valenciou (Ag1+, Ag2+ a Ag3+). Štúdie in vitro ukázali, že nízke koncentrácie okysličených strieborných solí sú účinnejšie ako jednoiónové striebro (Ag1+) proti patogénnym baktériám, ako sú Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus a Escherichia coli8,9. Ďalší nový typ strieborného obväzu obsahuje ďalšie zložky, a to kyselinu etyléndiamíntetraoctovú (EDTA) a benzetóniumchlorid (BC), o ktorých sa uvádza, že cielia na biofilm EPS a tým zvyšujú penetráciu striebra do biofilmu. Tieto nové technológie striebra ponúkajú nové spôsoby, ako zacieliť na biofilmy rán. Vplyv týchto antimikrobiálnych látok na prostredie rany a hojenie nezávislé od infekcie je však dôležitý, aby sa zabezpečilo, že nevytvoria nepriaznivé prostredie rany alebo neoneskoria hojenie. Obavy z cytotoxicity striebra in vitro boli hlásené pri niekoľkých strieborných obväzoch10,11. Cytotoxicita in vitro sa však zatiaľ neprejavila v toxicite in vivo a niekoľko obväzov Ag1+ preukázalo dobrý bezpečnostný profil12.
V tejto štúdii sme skúmali účinnosť karboxymetylcelulózových obväzov obsahujúcich nové strieborné formulácie proti biofilmu rán in vitro a in vivo. Okrem toho sme hodnotili účinky týchto obväzov na imunitné reakcie a hojenie nezávisle od infekcie.
Všetky použité obväzy boli komerčne dostupné. 3M Kerracel Gel Fiber Dressing (3M, Knutsford, Spojené kráľovstvo) je neantimikrobiálny 100 % karboxymetylcelulózový (CMC) gélový obväz z vlákien, ktorý bol v tejto štúdii použitý ako kontrolný obväz. Boli hodnotené tri antimikrobiálne CMC strieborné obväzy, a to 3M Kerracel Ag (3M, Knutsford, Spojené kráľovstvo), ktorý obsahuje 1,7 % hmotn. okysličenej soli striebra (Ag7NO11) v iónoch striebra s vyššou valenciou (Ag1+, Ag2+ a Ag3+). Počas rozkladu Ag7NO11 sa tvoria ióny Ag1+, Ag2+ a Ag3+ v pomere 1:2:4. Krytie Aquacel Ag Extra s obsahom 1,2 % chloridu strieborného (Ag1+) (ConvaTec, Deeside, Spojené kráľovstvo) 13 a krytie Aquacel Ag + Extra s obsahom 1,2 % chloridu strieborného (Ag1+), EDTA a benzetóniumchloridu (ConvaTec, Deeside, Spojené kráľovstvo) 14.
V tejto štúdii boli použité kmene Pseudomonas aeruginosa NCTC 10781 (Public Health England, Salisbury) a Staphylococcus aureus NCTC 6571 (Public Health England, Salisbury).
Baktérie boli pestované cez noc v bujóne Muller-Hinton (Oxoid, Altrincham, Spojené kráľovstvo). Kultúra kultivovaná cez noc bola potom zriedená v pomere 1:100 v bujóne Mueller-Hinton a 200 µl bolo nanesených na sterilné 0,2 µm cykloporézne membrány Whatman (Whatman plc, Maidstone, Spojené kráľovstvo) na agarové platne Mueller-Hinton (Sigma-Aldrich Company Ltd, Kent, Veľká Británia). Tvorba kolóniových biofilmov pri teplote 37 °C počas 24 hodín. Tieto kolóniové biofilmy boli testované na logaritmické zmršťovanie.
Obväz nakrájajte na štvorcové kúsky s rozmermi 3 cm2 a vopred ich navlhčite sterilnou deionizovanou vodou. Obväz umiestnite cez biofilm kolónie na agarovej platni. Každých 24 ha biofilmu bolo odstránených a životaschopné baktérie v biofilme (CFU/ml) boli kvantifikované sériovým riedením (10−1 až 10−7) v neutralizačnom bujóne Day-Angle (Merck-Millipore). Po 24 hodinách inkubácie pri 37 °C boli vykonané štandardné počty na platniach na agarových platniach Mueller-Hinton. Každé ošetrenie a časový bod boli vykonané trojmo a počty na platniach boli opakované pre každé riedenie.
Koža z bravčovej brušnej časti sa získava zo samíc veľkých bielych ošípaných do 15 minút od porážky v súlade s vývoznými normami Európskej únie. Koža sa oholila a očistila alkoholovými utierkami, potom sa zmrazila na 24 hodín pri teplote -80 °C, aby sa devitalizovala. Po rozmrazení sa kúsky kože s veľkosťou 1 cm2 trikrát premyli PBS, 0,6 % chlórnanom sodným a 70 % etanolom, zakaždým po dobu 20 minút. Pred odstránením epidermy sa všetok zvyšný etanol odstráni trojnásobným premytím v sterilnom PBS. Koža sa kultivovala na 6-jamkovej platni s 0,45 μm hrubou nylonovou membránou (Merck-Millipore) navrchu a 3 absorpčnými podložkami (Merck-Millipore) obsahujúcimi 3 ml fetálneho bovinného séra (Sigma) doplneného o 10 % Dulbeccovho modifikovaného Eagleho média (Dulbeccovo modifikované Eagleho médium – Aldrich Ltd.).
Koloniálne biofilmy boli pestované podľa popisu pre štúdie expozície biofilmu. Po 72 hodinách kultivácie biofilmu na membráne bol biofilm aplikovaný na povrch kože pomocou sterilnej inokulačnej slučky a membrána bola odstránená. Biofilm bol potom inkubovaný na derme ošípanej ďalších 24 hodín pri teplote 37 °C, aby biofilm dozrel a priľnul ku koži ošípanej. Po dozretí a prichytení biofilmu bol priamo na povrch kože aplikovaný obväz s veľkosťou 1,5 cm2, vopred navlhčený sterilnou destilovanou vodou, a inkubovaný pri teplote 37 °C počas 24 hodín. Životaschopné baktérie boli vizualizované farbením rovnomerným nanesením činidla PrestoBlue na stanovenie životaschopnosti buniek (Invitrogen, Life Technologies, Paisley, Spojené kráľovstvo) na apikálny povrch každého explantátu a jeho inkubáciou počas 5 minút. Na okamžité zachytenie snímok na mikroskope Leica MZ8 použite digitálny fotoaparát Leica DFC425. Oblasti sfarbené do ružova boli kvantifikované pomocou softvéru Image Pro verzie 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD Image-Pro (mediacy.com)). Skenovacia elektrónová mikroskopia bola vykonaná podľa nižšie uvedeného postupu.
Baktérie pestované cez noc boli zriedené v pomere 1:100 v Mueller-Hintonovom bujóne. 200 μl kultúry bolo pridaných do sterilnej 0,2 μm Whatmanovej cykloporovej membrány (Whatman, Maidstone, Spojené kráľovstvo) a nanesené na Mueller-Hintonov agar. Biofilmové platne boli inkubované pri teplote 37 °C počas 72 hodín, aby sa umožnila tvorba zrelého biofilmu.
Po 3 dňoch dozrievania biofilmu sa priamo na biofilm umiestnil štvorcový obväz s rozmermi 3 cm2 a inkuboval sa pri teplote 37 °C počas 24 hodín. Po odstránení obväzu z povrchu biofilmu sa na povrch každého biofilmu na 20 sekúnd pridal 1 ml činidla PrestoBlue Cell Viability Reagent (Invitrogen, Waltham, MA). Povrchy sa vysušili a zmeny farby sa zaznamenali pomocou digitálneho fotoaparátu Nikon D2300 (Nikon UK Ltd., Kingston, Spojené kráľovstvo).
Kultúry pestované cez noc sa pripravia na agare Mueller-Hinton, jednotlivé kolónie sa prenesú do 10 ml bujónu Mueller-Hinton a inkubujú sa na trepačke pri teplote 37 °C (100 ot./min.). Po inkubácii cez noc sa kultúra zriedi v pomere 1:100 v bujóne Mueller-Hinton a 300 µl sa nanesie na kruhovú cykloporóznu membránu Whatman (Whatman International, Maidstone, Spojené kráľovstvo) s hrúbkou 0,2 µm na agare Mueller-Hinton a inkubuje sa pri teplote 37 °C počas 72 hodín. Zrelý biofilm sa aplikuje na ranu podľa nižšie uvedeného postupu.
Všetka práca so zvieratami sa vykonávala na Univerzite v Manchestri na základe projektovej licencie schválenej Úradom pre dobré životné podmienky zvierat a etické hodnotenie (P8721BD27) a v súlade s pokynmi publikovanými Ministerstvom vnútra podľa revidovaného zákona ASPA z roku 2012. Všetci autori dodržali pokyny pre príchod. Na všetky štúdie in vivo boli použité osemtýždňové myši C57BL/6j (Envigo, Oxon, Spojené kráľovstvo). Myši boli anestetizované izofluránom (Piramal Critical Care Ltd, West Drayton, Spojené kráľovstvo) a ich chrbtové povrchy boli oholené a vyčistené. Každej myši bola potom pomocou bioptického razníka Stiefel (Schuco International, Hertfordshire, Spojené kráľovstvo) vytvorená excízna rana s rozmermi 2 × 6 mm. V prípade rán infikovaných biofilmom sa na dermálnu vrstvu rany pomocou sterilnej očkovacej slučky ihneď po poranení aplikuje 72-hodinový koloniálny biofilm vypestovaný na membráne, ako je opísané vyššie, a membrána sa odstráni. Jeden štvorcový centimeter obväzu sa vopred navlhčí sterilnou vodou, aby sa udržalo vlhké prostredie rany. Obväzy boli aplikované priamo na každú ranu a prekryté filmom 3M Tegaderm (3M, Bracknell, Spojené kráľovstvo) a po okrajoch naneseným tekutým lepidlom Mastisol (Eloquest Healthcare, Ferndale, MI) pre zabezpečenie dodatočnej priľnavosti. Buprenorfín (Animalcare, York, Spojené kráľovstvo) bol podávaný v koncentrácii 0,1 mg/kg ako analgetikum. Myši boli utracené tri dni po poranení pomocou metódy Schedule 1 a oblasť rany bola podľa potreby odstránená, rozpolená a uskladnená.
Farbenie hematoxylínom (ThermoFisher Scientific) a eozínom (ThermoFisher Scientific) sa uskutočnilo podľa protokolu výrobcu. Plocha rany a reepitelizácia sa kvantifikovali pomocou softvéru Image Pro verzie 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD).
Rezy tkaniva boli odvoskované v xyléne (ThermoFisher Scientific, Loughborough, Spojené kráľovstvo), rehydratované 100 – 50 % etanolom a krátko ponorené do deionizovanej vody (ThermoFisher Scientific). Imunohistochemický rozbor bol vykonaný s použitím súpravy VectaStain Elite ABC PK-6104 (Vector Laboratories, Burlingame, CA) podľa protokolu výrobcu. Primárne protilátky proti neutrofilom NIMP-R14 (Thermofisher Scientific) a makrofágom Ms CD107b Pure M3/84 (BD Biosciences, Wokingham, Spojené kráľovstvo) boli zriedené v pomere 1:100 v blokovacom roztoku a pridané na povrch rezu, následne boli pridané 2 protilátky Anti-, VectaStain ABC a súprava substrátov Vector Nova Red Peroxidase (HRP) (Vector Laboratories, Burlingame, CA) a kontrastne farbené hematoxylínom. Snímky boli získané pomocou mikroskopu Olympus BX43 a digitálneho fotoaparátu Olympus DP73 (Olympus, Southend-on-Sea, Spojené kráľovstvo).
Vzorky kože boli fixované v 2,5 % glutaraldehyde a 4 % formaldehyde v 0,1 M HEPES (pH 7,4) počas 24 hodín pri teplote 4 °C. Vzorky boli dehydratované pomocou stupňovitého etanolu a sušené v CO2 pomocou sušičky kritických bodov Quorum K850 (Quorum Technologies Ltd, Loughton, Spojené kráľovstvo) a naprašované zliatinou zlata a paládia pomocou mini rozprašovacieho/tlejivého výbojového systému Quorum SC7620. Vzorky boli zobrazené pomocou skenovacieho elektrónového mikroskopu FEI Quanta 250 (ThermoFisher Scientific) na vizualizáciu centrálneho bodu rany.
Na vyrezaný povrch rany myši bol aplikovaný jodid Toto-1 (2 μM) a inkubovaný 5 minút pri teplote 37 °C (ThermoFisher Scientific) a ošetrený Syto-60 (10 μM) pri teplote 37 °C (ThermoFisher Scientific). 15-minútové Z-stack snímky boli vytvorené pomocou Leica TCS SP8.
Biologické a technické replikačné údaje boli spracované do tabuliek a analyzované pomocou softvéru Graphpad Prism V9 (GraphPad Software, La Jolla, CA). Na testovanie rozdielov medzi jednotlivými ošetreniami a kontrolným obväzom bez antimikrobiálnych látok bola použitá jednofaktorová analýza rozptylu s viacnásobnými porovnaními s použitím Dunnettovho post hoc testu. Hodnota p < 0,05 bola považovaná za významnú.
Účinnosť vláknitých obväzov so strieborným gélom bola prvýkrát hodnotená na biofilmových kolóniách Staphylococcus aureus a Pseudomonas aeruginosa in vitro. Strieborné obväzy obsahujú rôzne zloženia striebra: tradičné strieborné obväzy produkujú ióny Ag1+; strieborné obväzy, ktoré môžu po pridaní EDTA/BC produkovať ióny Ag1+, môžu zničiť matricu biofilmu a vystaviť baktérie striebru pod antibakteriálnym účinkom iónov striebra15 a obväzy obsahujúce okysličené soli striebra, ktoré produkujú ióny Ag1+, Ag2+ a Ag3+. Jeho účinnosť bola porovnaná s kontrolným obväzom bez antimikrobiálneho účinku vyrobeným z gélových vlákien. Zostávajúce životaschopné baktérie v biofilme boli hodnotené každých 24 hodín počas 8 dní (obrázok 1). Na 5. deň bol biofilm reinokulovaný s 3,85 × 105S Staphylococcus aureus alebo 1,22 × 105P. aeruginosa na posúdenie obnovy biofilmu. V porovnaní s kontrolnými obväzmi bez antimikrobiálneho účinku mali obväzy s Ag1+ minimálny vplyv na životaschopnosť baktérií v biofilmoch Staphylococcus aureus a Pseudomonas aeruginosa počas 5 dní. Naproti tomu obväzy obsahujúce okysličené Ag a soli Ag1+ + EDTA/BC boli účinné pri ničení baktérií v biofilme do 5 dní. Po opakovanej inokulácii planktónovými baktériami na 5. deň sa nepozorovala žiadna obnova biofilmu (obr. 1).
Kvantifikácia životaschopných baktérií v biofilmoch Staphylococcus aureus a Pseudomonas aeruginosa po ošetrení striebornými obväzmi. Kolónie biofilmu Staphylococcus aureus a Pseudomonas aeruginosa boli ošetrené striebornými obväzmi alebo kontrolnými obväzmi bez antimikrobiálnych látok a počet zostávajúcich životaschopných baktérií bol stanovený každých 24 hodín. Po 5 dňoch bol biofilm reinokulovaný s 3,85 × 105S. Staphylococcus aureus alebo 1,22 × 105P. Kolónie bakterioplanktónu Pseudomonas aeruginosa boli vytvorené jednotlivo na posúdenie obnovy biofilmu. Grafy znázorňujú priemer +/- štandardnú chybu.
Na vizualizáciu vplyvu strieborných obväzov na životaschopnosť biofilmu boli obväzy aplikované na zrelé biofilmy vypestované na koži ošípaných ex vivo. Po 24 hodinách sa obväz odstráni a biofilm sa zafarbí modrým reaktívnym farbivom, ktoré je metabolizované živými baktériami na ružovú farbu. Biofilmy ošetrené kontrolnými obväzmi boli ružové, čo naznačuje prítomnosť životaschopných baktérií v biofilme (obrázok 2A). Naproti tomu biofilm ošetrený obväzom Ag oxysols bol primárne modrý, čo naznačuje, že zostávajúce baktérie na povrchu kože ošípanej boli neživotaschopné baktérie (obrázok 2B). V biofilmoch ošetrených obväzmi obsahujúcimi Ag1+ sa pozorovalo zmiešané modré a ružové sfarbenie, čo naznačuje prítomnosť životaschopných a neživotaschopných baktérií v biofilme (obrázok 2C), zatiaľ čo obväzy EDTA/BC obsahujúce Ag1+ boli prevažne modré s niekoľkými ružovými škvrnami, čo naznačuje oblasti, ktoré neboli ovplyvnené strieborným obväzom (obrázok 2D). Kvantifikácia aktívnych (ružových) a neaktívnych (modrých) oblastí ukázala, že kontrolná náplasť bola na 75 % aktívna (obrázok 2E). Krytie Ag1+ + EDTA/BC fungovalo podobne ako krytie s okysličenými soľami Ag, s mierou prežitia 13 %, respektíve 14 %. Krytie Ag1+ tiež znížilo životaschopnosť baktérií o 21 %. Tieto biofilmy boli potom pozorované pomocou skenovacej elektrónovej mikroskopie (SEM). Po ošetrení kontrolným krytím a krytím Ag1+ bola pozorovaná vrstva Pseudomonas aeruginosa pokrývajúca bravčovú kožu (obrázok 2F,H), zatiaľ čo po ošetrení krytím Ag1+ sa našlo málo bakteriálnych buniek a málo bakteriálnych buniek sa našlo aj pod nimi. Kolagénové vlákna možno považovať za tkanivovú štruktúru bravčovej kože (obrázok 2G). Po ošetrení krytím Ag1+ + EDTA/BC boli viditeľné bakteriálne plaky a pod nimi ležiace plaky kolagénových vlákien (obrázok 2I).
Vizualizácia biofilmu Pseudomonas aeruginosa po ošetrení strieborným obväzom. (A–D) Životaschopnosť baktérií v biofilmoch Pseudomonas aeruginosa pestovaných na bravčovej koži bola vizualizovaná pomocou farbiva PrestoBlue 24 hodín po ošetrení striebornými obväzmi alebo kontrolnými obväzmi bez antimikrobiálnych látok. Živé baktérie sú ružové, neživotaschopné baktérie a bravčová koža sú modré. (E) Kvantifikácia biofilmov Pseudomonas aeruginosa pestovaných na bravčovej koži (ružová škvrna) pomocou skenovacej elektrónovej mikroskopie Image Pro verzie 10 (FI) a ošetrených strieborným obväzom alebo kontrolným obväzom bez antimikrobiálnych látok počas 24 hodín. Mierka SEM = 5 µm. (J–M) Koloniálne biofilmy rástli na filtroch a boli zafarbené reaktívnym farbivom PrestoBlue po 24 hodinách inkubácie so striebornými obväzmi.
Aby sa zistilo, či úzky kontakt medzi obväzmi a biofilmami ovplyvnil účinnosť obväzov, kolóniové biofilmy umiestnené na rovnom povrchu boli ošetrené obväzmi počas 24 hodín a potom zafarbené reaktívnymi farbivami. Neošetrený biofilm mal tmavoružovú farbu (obrázok 2J). Na rozdiel od biofilmov ošetrených obväzmi obsahujúcimi okysličené soli striebra (obrázok 2K), biofilmy ošetrené obväzmi obsahujúcimi Ag1+ alebo Ag1+ + EDTA/BC vykazovali pásy ružového sfarbenia (obrázok 2L,M). Toto ružové sfarbenie naznačuje prítomnosť životaschopných baktérií a súvisí s oblasťou stehu v obväze. Tieto zošité oblasti vytvárajú mŕtve priestory, ktoré umožňujú baktériám v biofilme prežiť.
Na vyhodnotenie účinnosti strieborných obväzov in vivo boli rany myší infikovaných zrelými biofilmami S. aureus a P. aeruginosa ošetrené kontrolnými obväzmi bez antimikrobiálnych látok alebo striebornými obväzmi. Po 3 dňoch liečby makroskopická analýza obrazu ukázala menšie veľkosti rán pri ošetrení obväzmi s okysličenou soľou v porovnaní s kontrolnými obväzmi bez antimikrobiálnych látok a inými striebornými obväzmi (obrázok 3A-H). Na potvrdenie týchto pozorovaní boli rany odobraté a plocha rany a reepitelizácia boli kvantifikované na tkanivových rezoch zafarbených hematoxylínom a eozínom pomocou softvéru Image Pro verzie 10 (obrázok 3I-L).
Vplyv strieborných obväzov na povrch rany a reepitelizácia rán infikovaných biofilmami. (A–H) Malé bunky infikované biofilmami Pseudomonas aeruginosa (A–D) a Staphylococcus aureus (E–H) po troch dňoch liečby kontrolným obväzom bez antimikrobiálneho obsahu, obväzom s okysličenou soľou Ag, obväzom Ag1+ a obväzom Ag1+. Reprezentatívne makroskopické snímky. Rany myší s obväzom Ag1+ + EDTA/BC. (IL) Reprezentatívna infekcia Pseudomonas aeruginosa, histologické rezy farbené hematoxylínom a eozínom, použité na kvantifikáciu plochy rany a regenerácie epitelu. Kvantifikácia plochy rany (M, O) a percentuálnej reepitelizácie (N, P) rán infikovaných biofilmami Pseudomonas aeruginosa (M, N) a Staphylococcus aureus (O, P) (na liečebnú skupinu n = 12). Grafy znázorňujú priemer +/- štandardnú chybu. * znamená p = < 0,05 ** znamená p = < 0,01; Makroskopická mierka = 2,5 mm, histologická mierka = 500 µm.
Kvantifikácia plochy rany v ranách infikovaných biofilmom Pseudomonas aeruginosa (obrázok 3M) ukázala, že rany ošetrené oxysolami Ag mali priemernú veľkosť rany 2,5 mm2, zatiaľ čo kontrolný obväz bez antimikrobiálnych látok mal priemernú veľkosť rany 3,1 mm2, čo nie je pravda. Dosiahla štatistickú významnosť (obrázok 3M). p = 0,423). Rany ošetrené Ag1+ alebo Ag1+ + EDTA/BC nevykazovali žiadne zníženie plochy rany (3,1 mm2 a 3,6 mm2). Liečba obväzom s okysličenou soľou Ag podporila reepitelizáciu vo väčšej miere ako kontrolný obväz bez antimikrobiálnych látok (34 % a 15 %; p = 0,029) a Ag1+ alebo Ag1+ + EDTA/BC (10 % a 11 %) (obrázok 3N).
Podobné trendy v ploche rany a regenerácii epitelu boli pozorované u rán infikovaných biofilmmi S. aureus (obrázok 3O). Krytie obsahujúce okysličené soli striebra znížilo plochu rany (2,0 mm2) o 23 % v porovnaní s kontrolným neantimikrobiálnym krytím (2,6 mm2), hoci toto zníženie nebolo významné (p = 0,304) (obrázok 3O). Okrem toho sa plocha rany v skupine liečenej Ag1+ mierne znížila (2,4 mm2), zatiaľ čo rana ošetrená krytím Ag1+ + EDTA/BC plochu rany nezmenšila (2,9 mm2). Kyslíkaté soli striebra tiež podporovali reepitelizáciu rán infikovaných biofilmom S. aureus (31 %) vo väčšej miere ako rany ošetrené kontrolnými krytiami bez antimikrobiálnych látok (12 %, p = 0,003) (obrázok 3P). Krytie Ag1+ (16 %, p = 0,903) a krytie Ag+1 + EDTA/BC (14 %, p = 0,965) vykazovali podobné úrovne regenerácie epitelu ako v kontrolnej skupine.
Na vizualizáciu účinku strieborných obväzov na matricu biofilmu sa vykonalo farbenie jodidmi Toto 1 a Syto 60 (obr. 4). Jodid Toto 1 je farbivo nepriepustné pre bunky, ktoré možno použiť na presnú vizualizáciu extracelulárnych nukleových kyselín, ktoré sú hojne zastúpené v EPS biofilmoch. Syto 60 je farbivo priepustné pre bunky používané ako kontrastné farbivo16. Pozorovania jodidu Toto 1 a Syto 60 v ránach inokulovaných biofilmmi Pseudomonas aeruginosa (obrázok 4A-D) a Staphylococcus aureus (obrázok 4I-L) ukázali, že po 3 dňoch liečby obväzom sa EPS v biofilme významne znížil. Obväzy obsahujúce okysličené soli Ag a Ag1+ + EDTA/BC. Ag1+ bez ďalších antibiotických zložiek biofilmu významne znížili voľnú bunkovú DNA v ránach inokulovaných Pseudomonas aeruginosa, ale boli menej účinné v ránach inokulovaných Staphylococcus aureus.
Zobrazovanie biofilmu rany in vivo po 3 dňoch liečby kontrolnými alebo striebornými obväzmi. Konfokálne snímky Pseudomonas aeruginosa (A–D) a Staphylococcus aureus (I–L) zafarbené farbivom Toto 1 (zelená) na vizualizáciu extracelulárnych nukleových kyselín, ktoré sú súčasťou polymérov extracelulárneho biofilmu. Na farbenie intracelulárnych nukleových kyselín použite Syto 60 (červená). kyseliny. P. Skenovacia elektrónová mikroskopia rán infikovaných biofilmmi Pseudomonas aeruginosa (E–H) a Staphylococcus aureus (M–P) po 3 dňoch liečby kontrolnými a striebornými obväzmi. Mierka SEM = 5 µm. Mierka konfokálneho zobrazovania = 50 µm.
Skenovacia elektrónová mikroskopia ukázala, že myši inokulované biofilmovými kolóniami Pseudomonas aeruginosa (obrázok 4E-H) a Staphylococcus aureus (obrázok 4M-P) mali po 3 dňoch liečby obväzmi so striebrom v ranách výrazne menej baktérií.
Na vyhodnotenie účinku strieborných obväzov na zápal rán u myší infikovaných biofilmom boli rezy rán infikovaných biofilmom liečených kontrolnými alebo striebornými obväzmi počas 3 dní imunohistochemicky farbené s použitím protilátok špecifických pre neutrofily a makrofágy. Kvantitatívne stanovenie neutrofilov a makrofágov interne. granulačné tkanivo. Obrázok 5). Všetky strieborné obväzy znížili počet neutrofilov a makrofágov v ránach infikovaných Pseudomonas aeruginosa v porovnaní s kontrolnými obväzmi bez antimikrobiálnych látok po troch dňoch liečby. Liečba obväzom s okysličenou striebornou soľou však viedla k väčšiemu zníženiu neutrofilov (p = <0,0001) a makrofágov (p = <0,0001) v porovnaní s inými testovanými striebornými obväzmi (obrázok 5I,J). Hoci Ag1+ + EDTA/BC mal väčší účinok na biofilm rán, znížil hladiny neutrofilov a makrofágov v menšej miere ako obväz Ag1+. Stredne závažné rany infikované biofilmom S. aureus boli pozorované aj po obväze s oxizolmi Ag (p = <0,0001), Ag1+ (p = 0,0008) a Ag1++ EDTA/BC (p = 0,0043) v porovnaní s kontrolnou skupinou. Podobné trendy sa pozorujú aj pri obväze s neutropéniou (obr. 5K). Avšak iba obväz s okysličenou soľou Ag vykazoval významné zníženie počtu makrofágov v granulačnom tkanive v porovnaní s kontrolnou skupinou v ranách infikovaných biofilmom S. aureus (p = 0,0339) (obrázok 5L).
Neutrofily a makrofágy boli kvantifikované v ranách infikovaných biofilmami Pseudomonas aeruginosa a Staphylococcus aureus po 3 dňoch liečby kontrolnými obväzmi bez antimikrobiálneho účinku alebo striebornými obväzmi. Neutrofily (AD) a makrofágy (EH) boli kvantifikované v tkanivových rezoch zafarbených protilátkami špecifickými pre neutrofily alebo makrofágy. Kvantifikácia neutrofilov (I a K) a makrofágov (J a L) v ranách infikovaných biofilmami Pseudomonas aeruginosa (I a J) a Staphylococcus aureus (K a L). N = 12 na skupinu. Grafy znázorňujú priemer +/- štandardnú chybu, hodnoty významnosti v porovnaní s kontrolným obväzom bez antibakteriálneho účinku, * znamená p = < 0,05, ** znamená p = < 0,01; *** znamená p = < 0,001; označuje p = < 0,0001).
Následne sme vyhodnotili vplyv strieborných obväzov na hojenie nezávislé od infekcie. Neinfikované excízne rany boli ošetrené kontrolným obväzom bez antimikrobiálnych látok alebo strieborným obväzom počas 3 dní (obrázok 6). Spomedzi testovaných strieborných obväzov sa na makroskopických snímkach javili menšie iba rany ošetrené obväzom s okysličenou soľou ako rany ošetrené kontrolnou skupinou (obrázok 6A-D). Kvantifikácia plochy rany pomocou histologickej analýzy ukázala, že priemerná plocha rany po ošetrení obväzom Ag oxysols bola 2,35 mm2 v porovnaní s 2,96 mm2 pre rany ošetrené kontrolnou skupinou, ale tento rozdiel nedosiahol štatistickú významnosť (p = 0,488) (obr. 6I). Naopak, po ošetrení obväzmi Ag1+ (3,38 mm2, p = 0,757) alebo Ag1+ + EDTA/BC (4,18 mm2, p = 0,054) sa v porovnaní s kontrolnou skupinou nepozorovalo žiadne zníženie plochy rany. Zvýšená regenerácia epitelu sa pozorovala pri použití obväzu s Ag oxysolom v porovnaní s kontrolnou skupinou (30 % oproti 22 %), hoci to nedosiahlo štatistickú významnosť (p = 0,067), je to dosť významné a potvrdzuje to predchádzajúce výsledky. Obväz s oxysolmi podporuje reepitelizáciu. -Epitelizácia neinfikovaných rán17. Naproti tomu liečba obväzmi s Ag1+ alebo Ag1+ + EDTA/BC nemala žiadny účinok alebo vykazovala zníženú reepitelizáciu v porovnaní s kontrolnou skupinou.
Vplyv strieborného obväzu na hojenie rán u neinfikovaných myší s kompletnou resekciou. (AD) Reprezentatívne makroskopické snímky rán po troch dňoch liečby kontrolným obväzom bez antimikrobiálnych látok a strieborným obväzom. (EH) Reprezentatívne rezy rán zafarbené hematoxylínom a eozínom. Kvantifikácia plochy rany (I) a percento reepitelizácie (J) boli vypočítané z histologických rezov v strede rany pomocou softvéru na analýzu obrazu (n = 11–12 na liečebnú skupinu). Grafy znázorňujú priemer +/- štandardnú chybu. * znamená p = <0,05.
Striebro má dlhú históriu používania ako antimikrobiálna terapia pri hojení rán, ale mnohé rôzne formulácie a spôsoby podávania môžu viesť k rozdielom v antimikrobiálnej účinnosti 18. Navyše, vlastnosti špecifických systémov na dodávanie striebra ako biofilmu nie sú úplne pochopené. Hoci je imunitná odpoveď hostiteľa relatívne účinná proti planktónovým baktériám, vo všeobecnosti je menej účinná proti biofilmom 19. Planktónové baktérie sú ľahko fagocytované makrofágmi, ale v rámci biofilmov predstavujú agregované bunky ďalšie problémy tým, že obmedzujú odpoveď hostiteľa do tej miery, že imunitné bunky môžu podstúpiť apoptózu a uvoľniť prozápalové faktory na zvýšenie imunitnej odpovede 20. Bolo pozorované, že niektoré leukocyty môžu preniknúť cez biofilmy 21, ale nie sú schopné fagocytovať baktérie, akonáhle je táto obrana narušená 22. Na podporu imunitnej odpovede hostiteľa proti infekcii biofilmu rany by sa mal použiť holistický prístup. Debridement rany môže fyzicky narušiť biofilm a odstrániť väčšinu biozáťaže, ale imunitná odpoveď hostiteľa môže byť neúčinná proti zostávajúcemu biofilmu, najmä ak je imunitná odpoveď hostiteľa narušená. Antimikrobiálne terapie, ako sú strieborné obväzy, teda môžu podporovať imunitnú odpoveď hostiteľa a eliminovať infekcie biofilmu. Zloženie, koncentrácia, rozpustnosť a substrát na podávanie môžu ovplyvniť antimikrobiálnu účinnosť striebra. V posledných rokoch pokroky v technológii spracovania striebra zvýšili účinnosť týchto obväzov9,23. S pokrokom v technológii strieborných obväzov je dôležité pochopiť účinnosť týchto obväzov pri kontrole infekcie rany a, čo je dôležitejšie, vplyv týchto silných foriem striebra na prostredie rany a hojenie.
V tejto štúdii sme porovnávali účinnosť dvoch pokročilých strieborných obväzov s konvenčnými striebornými obväzmi, ktoré produkujú ióny Ag1+ proti biofilmom, s použitím rôznych modelov in vitro a in vivo. Taktiež sme hodnotili vplyv týchto obväzov na prostredie rany a hojenie nezávislé od infekcie. Aby sa minimalizoval vplyv dodávacej matrice, všetky testované strieborné obväzy boli zložené z karboxymetylcelulózy.
Naše predbežné hodnotenie týchto strieborných obväzov proti koloniálnym biofilmom Pseudomonas aeruginosa a Staphylococcus aureus ukazuje, že na rozdiel od tradičných obväzov Ag1+ sú dva pokročilé strieborné obväzy, Ag1+ + EDTA/BC a okysličené soli Ag, účinné pri 5. Účinne ničia baktérie biofilmu v priebehu niekoľkých dní. Okrem toho tieto obväzy zabraňujú opätovnej tvorbe biofilmu po opakovanom vystavení planktónovým baktériám. Obväz Ag1+ obsahoval chlorid strieborný, rovnakú zlúčeninu striebra a základnú matricu ako Ag1+ + EDTA/BC a mal obmedzený vplyv na životaschopnosť baktérií v biofilme počas rovnakého obdobia. Pozorovanie, že obväz Ag1+ + EDTA/BC bol účinnejší proti biofilmu ako obväz Ag1+ pozostávajúci z rovnakej matrice a zlúčeniny striebra, podporuje myšlienku, že na zvýšenie účinnosti chloridu strieborného proti biofilmu sú potrebné ďalšie zložky, ako bolo uvedené inde15. Tieto výsledky podporujú myšlienku, že BC a EDTA zohrávajú ďalšiu úlohu prispievajúcu k celkovej účinnosti krytia a že absencia tejto zložky v krytiach Ag1+ mohla prispieť k neschopnosti preukázať účinnosť in vitro. Zistili sme, že krytia s okysličenými soľami Ag produkujúce ióny Ag2+ a Ag3+ vykazovali silnejšiu antibakteriálnu účinnosť ako Ag1+ a na úrovniach podobných Ag1+ + EDTA/BC. Vzhľadom na vysoký redoxný potenciál však nie je jasné, ako dlho zostávajú ióny Ag3+ aktívne a účinné proti biofilmom rán, a preto si zaslúžia ďalšie štúdium. Okrem toho existuje mnoho rôznych krytí, ktoré generujú ióny Ag1+, ktoré neboli v tejto štúdii testované. Tieto krytia sa skladajú z rôznych zlúčenín striebra, koncentrácií a základných matríc, ktoré môžu ovplyvniť dodávanie iónov Ag1+ a ich účinnosť proti biofilmom. Za zmienku tiež stojí, že existuje mnoho rôznych modelov in vitro a in vivo používaných na hodnotenie účinnosti krytí rán proti biofilmom. Typ použitého modelu, ako aj obsah soli a bielkovín v médiu použitom v týchto modeloch, ovplyvní účinnosť krytia. V našom in vivo modeli sme nechali biofilm dozrieť in vitro a potom sme ho preniesli na dermálny povrch rany. Imunitná odpoveď hostiteľskej myši je relatívne účinná proti planktónovým baktériám aplikovaným na ranu, čím sa počas hojenia rany vytvára biofilm. Pridanie zrelého biofilmu k rane obmedzuje účinnosť imunitnej odpovede hostiteľa na tvorbu biofilmu tým, že umožňuje zrelému biofilmu etablovať sa v rane skôr, ako sa môže začať hojenie. Náš model nám teda umožňuje vyhodnotiť účinnosť antimikrobiálnych obväzov na zrelé biofilmy skôr, ako sa rany začnú hojiť.
Zistili sme tiež, že prispôsobenie krytia ovplyvňuje účinnosť strieborných krytí na biofilmoch pestovaných in vitro a bravčovej koži. Blízky kontakt s ranou sa považuje za kritický pre antimikrobiálnu účinnosť krytia24,25. Krytie obsahujúce okysličené soli striebra boli v úzkom kontakte so zrelými biofilmami, čo viedlo k významnému zníženiu počtu životaschopných baktérií v biofilme po 24 hodinách. Naopak, pri ošetrení krytím Ag1+ a Ag1+ + EDTA/BC zostal významný počet životaschopných baktérií. Tieto krytia obsahujú stehy po celej dĺžke krytia, čo vytvára mŕtve priestory, ktoré bránia úzkemu kontaktu s biofilmom. V našich štúdiách in vitro tieto nekontaktné oblasti zabránili usmrteniu životaschopných baktérií v biofilme. Životaschopnosť baktérií sme hodnotili až po 24 hodinách ošetrenia; Postupom času, ako sa krytie stáva viac nasýteným, môže byť menej mŕtveho priestoru, čím sa zmenšuje plocha pre tieto životaschopné baktérie. To však zdôrazňuje dôležitosť zloženia krytia, nielen typu striebra v krytí.
Hoci štúdie in vitro sú užitočné na porovnávanie účinnosti rôznych strieborných technológií, je tiež dôležité pochopiť účinky týchto obväzov na biofilmy in vivo, kde hostiteľské tkanivo a imunitné reakcie prispievajú k účinnosti obväzov proti biofilmom. Účinok týchto obväzov na biofilmy rán bol pozorovaný pomocou skenovacej elektrónovej mikroskopie a EPS farbenia biofilmu s použitím intracelulárnych a extracelulárnych DNA farbív. Zistili sme, že po 3 dňoch liečby boli všetky obväzy účinné pri redukcii bezbunkovej DNA v ranách infikovaných biofilmom, ale obväz Ag1+ bol menej účinný v ranách infikovaných Staphylococcus aureus. Skenovacia elektrónová mikroskopia tiež ukázala, že v ranách liečených striebornými obväzmi bolo prítomných výrazne menej baktérií, hoci to bolo výraznejšie pri obväze s okysličenou soľou Ag a obväze Ag1+ + EDTA/BC v porovnaní s obväzom Ag1+. Tieto údaje ukazujú, že testované strieborné obväzy mali rôzny stupeň vplyvu na štruktúru biofilmu, ale žiadny zo strieborných obväzov nebol schopný biofilm odstrániť, čo podporuje potrebu holistického prístupu k liečbe infekcií biofilmu rán; použitie strieborných náramkov. Liečbe predchádza fyzikálny debridement, ktorým sa odstráni väčšina biofilmu.
Chronické rany sú často v stave silného zápalu, pričom nadbytočné zápalové bunky zostávajú v tkanive rany dlhší čas, čo spôsobuje poškodenie tkaniva a vyčerpáva kyslík potrebný pre efektívny bunkový metabolizmus a funkciu v rane26. Biofilmy zhoršujú toto nehostinné prostredie rany tým, že negatívne ovplyvňujú hojenie rôznymi spôsobmi, vrátane inhibície proliferácie a migrácie buniek a aktivácie prozápalových cytokínov27. Keďže strieborné obväzy sú čoraz účinnejšie, je dôležité pochopiť ich vplyv na prostredie rany a hojenie.
Je zaujímavé, že hoci všetky strieborné obväzy ovplyvnili zloženie biofilmu, iba obväzy s okysličenými striebornými soľami zvýšili reepitelizáciu týchto infikovaných rán. Tieto údaje podporujú naše predchádzajúce zistenia17 a zistenia Kalana a kol. (2017)28, ktorí preukázali dobré profily bezpečnosti a toxicity okysličených strieborných solí, pretože nižšie koncentrácie striebra boli účinné proti biofilmom.
Naša súčasná štúdia zdôrazňuje rozdiely v technológii striebra medzi antimikrobiálnymi striebornými obväzmi a vplyv tejto technológie na prostredie rany a hojenie nezávislé od infekcie. Tieto výsledky sa však líšia od predchádzajúcich štúdií, ktoré ukazujú, že obväz Ag1+ + EDTA/BC zlepšil parametre hojenia poranených králičích uší in vivo. Môže to však byť spôsobené rozdielmi v zvieracích modeloch, časoch merania a metódach aplikácie baktérií29. V tomto prípade boli merania rany vykonané 12 dní po poranení, aby sa umožnilo účinným látkam obväzu pôsobiť na biofilm dlhšie. Toto tvrdenie podporuje štúdia, ktorá ukázala, že klinicky infikované vredy na nohách liečené Ag1+ + EDTA/BC sa spočiatku zväčšili po jednom týždni liečby a potom počas nasledujúcich 3 týždňov liečby Ag1+ + EDTA/BC a do 4 týždňov od používania neantimikrobiálnych liekov. obväzy s CMC na zmenšenie veľkosti vredov30.
Ukázalo sa, že určité formy a koncentrácie striebra sú in vitro cytotoxické 11, ale tieto výsledky in vitro sa nie vždy prejavia nežiaducimi účinkami in vivo. Okrem toho pokroky v technológii striebra a lepšie pochopenie zlúčenín striebra a ich koncentrácií v obväzoch viedli k vývoju mnohých bezpečných a účinných strieborných obväzov. S pokrokom v technológii strieborných obväzov je však dôležité pochopiť vplyv týchto obväzov na prostredie rany 31, 32, 33. Predtým sa uvádzalo, že zvýšená miera reepitelizácie zodpovedá zvýšenému podielu protizápalových makrofágov M2 v porovnaní s prozápalovým fenotypom M1. Toto sa pozorovalo v predchádzajúcom modeli na myšiach, kde sa obväzy na rany zo strieborného hydrogélu porovnávali so strieborným sulfadiazínom a neantimikrobiálnymi hydrogélmi 34.
Chronické rany môžu vykazovať nadmerný zápal a bolo pozorované, že prítomnosť nadbytočných neutrofilov môže byť škodlivá pre hojenie rán35. V štúdii na myšiach s depléciou neutrofilov prítomnosť neutrofilov oneskorila reepitelizáciu. Prítomnosť nadbytočných neutrofilov vedie k vysokým hladinám proteáz a reaktívnych foriem kyslíka, ako je superoxid a peroxid vodíka, ktoré sú spojené s chronickými a pomaly sa hojacimi ranami37,38. Podobne, ak je zvýšenie počtu makrofágov nekontrolované, môže viesť k oneskorenému hojeniu rán39. Toto zvýšenie je obzvlášť dôležité, ak makrofágy nie sú schopné prejsť z prozápalového fenotypu na prohojivý fenotyp, čo vedie k tomu, že rany nedokážu opustiť zápalovú fázu hojenia40. Pozorovali sme pokles neutrofilov a makrofágov v ranách infikovaných biofilmom po 3 dňoch liečby všetkými striebornými obväzmi, ale pokles bol výraznejší pri obväzoch s okysličenou soľou. Tento pokles môže byť priamym dôsledkom imunitnej odpovede na striebro, odpovede na zníženú biozáťaž alebo toho, že rana je v neskoršom štádiu hojenia, a preto je počet imunitných buniek v rane znížený. Zníženie počtu zápalových buniek v rane môže udržiavať prostredie priaznivé pre hojenie rán. Mechanizmus účinku, ako oxysoli Ag podporujú hojenie nezávislé od infekcie, nie je jasný, ale schopnosť oxysolí Ag produkovať kyslík a ničiť škodlivé hladiny peroxidu vodíka, mediátora zápalu, by to mohla vysvetliť a vyžaduje si ďalšie štúdium17.
Chronické nehojace sa infikované rany predstavujú problém pre lekárov aj pacientov. Hoci mnohé obväzy tvrdia, že majú antimikrobiálnu účinnosť, výskum sa zriedka zameriava na iné kľúčové faktory ovplyvňujúce mikroprostredie rany. Táto štúdia ukazuje, že rôzne technológie striebra majú rôznu antimikrobiálnu účinnosť a, čo je dôležité, rôzne účinky na prostredie rany a hojenie, nezávisle od infekcie. Hoci tieto štúdie in vitro a in vivo preukazujú účinnosť týchto obväzov pri liečbe infekcií rán a podpore hojenia, na vyhodnotenie účinnosti týchto obväzov v klinických podmienkach sú potrebné randomizované kontrolované štúdie.
Súbory údajov použité a/alebo analyzované počas aktuálnej štúdie sú k dispozícii od príslušného autora na základe primeranej žiadosti.
Čas uverejnenia: 15. júla 2024